ips培養(yǎng)基是一種用于誘導(dǎo)人類多能干細(xì)胞(inducedpluripotentstemcells,簡(jiǎn)稱iPSCs)分化的培養(yǎng)基。iPSCs是從成人人體組織中重新編程而來(lái)的多能干細(xì)胞,具有與胚胎干細(xì)胞相同的多向分化能力,可以分化成各種不同類型的細(xì)胞。這些細(xì)胞可用于研究許多疾病和藥物的開(kāi)發(fā),并為治療某些疾病提供幫助。
1.DMEM/F12培養(yǎng)基
DMEM/F12是一種無(wú)血清、無(wú)動(dòng)物成分的培養(yǎng)基,其中包含必需氨基酸、糖類、維生素和鈉。該培養(yǎng)基的pH值為7.4,適合于支持iPSCs的生長(zhǎng)和增殖。
2.FBS(胎牛血清)
FBS是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑,可提供細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。在培養(yǎng)基中,F(xiàn)BS的濃度通常為15%。
3.靶向因子
靶向因子是一種刺激iPSCs自然分化的化學(xué)物質(zhì)。常見(jiàn)的靶向因子包括BMP、ActivinA和bFGF等。這些因子的添加可以促進(jìn)iPSCs向特定細(xì)胞類型分化,并影響iPSCs生長(zhǎng)和增殖。
4.抗生素
抗生素是一種用于防止細(xì)菌污染的藥物。在培養(yǎng)基中,通常添加青霉素和鏈霉素等廣譜抗生素,以確保iPSCs在無(wú)菌條件下生長(zhǎng)和繁殖。
5.防止細(xì)胞黏附的滑液
由于iPSCs需要生長(zhǎng)在支持層上,因此必須添加一種防止細(xì)胞黏附的劑,以防止iPSCs附著在表面上。典型的滑液包括聚乙二醇(polyethyleneglycol)和Matrigel等。
在使用ips培養(yǎng)基進(jìn)行iPSCs培養(yǎng)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
1.培養(yǎng)基應(yīng)在無(wú)菌條件下制備,以避免細(xì)菌和病毒的污染。
2.每天應(yīng)更換新鮮的培養(yǎng)基,以確保iPSCs得到足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。
3.需要定期檢查iPSCs培養(yǎng)基中是否存在細(xì)菌或霉菌等污染物。
4.培養(yǎng)溫度應(yīng)為37℃,CO2濃度應(yīng)維持在5%左右。